安捷倫：茶葉世界探秘：發(fā)現(xiàn) D-型氨基酸 

       近期，安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶樹生物學(xué)與資源利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室宛曉春和楊小根研究團(tuán)隊(duì)在《食品化學(xué)》雜志（Food Chemistry）上發(fā)表了一篇題為“茶葉中 D 型氨基酸的鑒定”的論文(Identification of D-amino acids in tea leaves)。初步研究表明，在茶葉中可檢測(cè)到 11 種 D 型氨基酸異構(gòu)體，且茶葉中氨基酸的消旋與加工方法和儲(chǔ)存時(shí)間有關(guān)聯(lián)。以下簡(jiǎn)單介紹這篇論文的內(nèi)容與展望。

       研究目標(biāo)：

       建立茶湯中19種蛋白質(zhì)氨基酸以及茶氨酸對(duì)映異構(gòu)體的富集、非衍生拆分、同時(shí)鑒定檢測(cè)的方法；驗(yàn)證茶葉中存在 D 型氨基酸的假說(shuō)并探尋茶葉加工儲(chǔ)存過(guò)程與氨基酸對(duì)映異構(gòu)化的關(guān)系。

       主要分析儀器：

       安捷倫高效液相色譜與 6545 高分辨四極桿飛行時(shí)間液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)（LC/Q-TOF)

       研究途徑：

       茶湯中的游離氨基酸通過(guò)離子交換固相萃取，富集后的氨基酸經(jīng)手性液相色譜拆分 20 對(duì)氨基酸對(duì)映異構(gòu)體，然后由 6545 LC/Q-TOF 進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)，對(duì)被測(cè)化合物同時(shí)進(jìn)行全掃描和子離子掃描，以達(dá)到定性鑒定和定量測(cè)定在同次分析中完成。分析了 19 種茶葉樣品的氨基酸異構(gòu)體，研究不同加工工藝、不同存儲(chǔ)時(shí)間與 D-和 L-氨基酸濃度的關(guān)系。

       研究成果：

       1）建立了 D 型氨基酸的分析方法。其特點(diǎn)是通過(guò)離子交換富集純化茶湯中的氨基酸，利用手性色譜對(duì)非衍生氨基酸對(duì)映異構(gòu)體的拆分和質(zhì)譜對(duì)不同氨基酸的分辨能力，同時(shí)分離鑒定氨基酸對(duì)映異構(gòu)體

       2）驗(yàn)證茶葉中含有 D 型氨基酸的假說(shuō)。對(duì) 19 種茶葉樣品的氨基酸對(duì)映異構(gòu)體的檢測(cè)表明，茶鮮葉中僅發(fā)現(xiàn) L 型氨基酸，未發(fā)現(xiàn) D 型氨基酸。而加工后的茶葉樣品中共檢測(cè)到11種D型氨基酸，其含量范圍跨度大，從痕量到 43  µg/g。研究結(jié)果證明了茶葉中含有 D 型氨基酸的假說(shuō)的成立。

       3）茶葉加工條件以及儲(chǔ)存時(shí)間與氨基酸異構(gòu)化的關(guān)系。對(duì)不同年份的白牡丹、大紅袍和祁門紅茶的研究表明，茶葉加工儲(chǔ)存條件對(duì)氨基酸的消旋以及降解程度有直接關(guān)系。D-氨基酸的濃度和 D/L 比通常隨著陳化時(shí)間而增加；在相同條件下，不同種類的氨基酸消旋化程度不同；黑茶的加工過(guò)程對(duì)氨基酸的消旋反應(yīng)有較大影響，這很可能與黑茶渥堆發(fā)酵時(shí)的微生物作用有關(guān)。

       結(jié)論：

       借助手性色譜柱與安捷倫高效液相色譜/高分辨四極桿飛行時(shí)間液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng) (UHPLC/Q-TOF)，建立了 20 對(duì)氨基酸對(duì)映異構(gòu)體有效拆分與檢測(cè)方法；驗(yàn)證了茶葉中存在D型氨基酸；研究初步表明氨基酸在茶葉中的消旋和降解程度與加工和儲(chǔ)存條件有直接關(guān)系。該研究為探尋茶葉變化的標(biāo)識(shí)參數(shù)提供了新思路。