島津：亞硝胺類和磺酸酯類遺傳毒性雜質檢測方案

       2019年6月，創新中心率先推出遺傳毒性雜質NMBA（N-亞硝基-N-甲基-4-氨基丁酸）LC-MS/MS解決方案。與此同時，對NDMA和NDEA的研究也已在《分析試驗室》2020年39卷2期上發表雜質上發表；關于NMBA的研究已在《中國藥學雜志》2020年55卷3期上發表。如下將上述研究報告分別簡述，供行業客戶參考。

 

       1.HS-GC-MS檢測原料藥厄貝沙坦中N-亞硝基二甲胺和N-亞硝基二乙胺本文利用島津公司GCMS-QP2020 NX氣相色譜-質譜聯用儀結合HS-20頂空進樣器，建立了原料藥厄貝沙坦中N-亞硝基二甲胺和N-亞硝基二乙胺的同時測定方法。在10~500ng/mL濃度范圍內各組分線性關系良好，相關系數均達到0.999以上，100ng/mL標準品溶液連續進樣6針，各組分峰面積RSD均小于2.40%。陰性空白樣品在40，80，160ng/mL加標濃度時，回收率為100.6%-104.6%，陽性空白樣品回收率為101.8%-108.7%。該方法簡單方便，頂空進樣不污染氣化室，能夠有效的檢測原料藥厄貝沙坦中N-亞硝基二甲胺和N-亞硝基二乙胺的含量。

 

       2.島津中國推出氯沙坦鉀中N-亞硝基-N-甲基-4-氨基丁酸（NMBA）解決方案本文利用島津公司LCMS-8050高效液相色譜-三重四極桿質譜聯用儀，建立了原料藥中氯沙坦鉀中NMBA的測定方法。該方法中NMBA在0.1 ~ 50.0 ng/mL范圍內線性關系良好，日內和日間的精密度保留時間和峰面積的重復性良好(RSD均小于1.10%，n = 6和n = 18)，在低中高3個濃度的平均回收率在94.40 ~ 98.04%之間。該方法簡單方便，能夠快速有效的檢測氯沙坦鉀原料藥中NMBA的含量。

 

       3.GC-MS內標法測定甲磺酸中甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯、甲磺酸異丙酯本文利用島津公司GCMS-QP2020 NX氣相色譜-質譜聯用儀，參照《歐洲藥典》9.0和ICH指導原則，建立了以甲磺酸丁酯（BMS）為內標測定甲磺酸中甲磺酸甲酯（MMS）、甲磺酸乙酯（MES）和甲磺酸異丙酯（IMS）的方法并完成方法學驗證。在1~10000ng/mL濃度范圍內甲磺酸甲酯線性關系良好，在1~100ng/mL內甲磺酸乙酯和甲磺酸異丙酯線性關系良好，相關系數均達到0.999以上，樣品平行測定6次，計算各組分含量RSD均小于3.33%。樣品在650，850，1000ng/mL加標濃度時，MMS回收率為91.85%-103.09%，在10ng/mL加標濃度時，EMS、IMS回收率為92.21%-105.93%。該方法靈敏度和準確度高，能夠有效的檢測甲磺酸中MMS、EMS和IMS的含量。

 

       4.GC-MS內標曲線法測定甲磺酸中甲磺酰氯本文利用島津公司GCMS-QP2020NX氣相色譜-質譜聯用儀，參照《歐洲藥典》9.0和ICH指導原則，建立了以甲磺酸丁酯（BMS）為內標測定甲磺酸中甲磺酰氯的方法并完成方法學驗證。在1~5000ng/mL濃度范圍內甲磺酰氯線性關系良好，相關系數達到0.999，樣品平行測定6次，計算組分含量RSD為1.19%。樣品在320，400，480ng/mL加標濃度時，甲磺酰氯回收率為100.09%-109.84%。該方法靈敏度和準確度高，能夠有效的檢測甲磺酸中甲磺酰氯的含量。

 

       5.HS-GC-MS法測定甲磺酸倍他司汀中甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯、甲磺酸異丙酯本文利用島津公司GCMS-QP2020 NX氣相色譜-質譜聯用儀結合HS-20頂空進樣器，參照《歐洲藥典》9.0和ICH指導原則，建立了以甲磺酸丁酯（BMS）為內標，通過碘化鈉衍生化，測定甲磺酸倍他司汀原料藥中甲磺酸甲酯（MMS）、甲磺酸乙酯（MES）和甲磺酸異丙酯（IMS）的方法并完成方法學驗證。在1~250ng/mL濃度范圍內MMS和EMS線性關系良好，在1.5~250ng/mL內IMS線性關系良好，相關系數均達到0.999以上，樣品加標平行測定6次，計算各組分含量RSD均小于2.40%。樣品在80，100，120ng/mL加標濃度時，MMS、 EMS和IMS回收率在93.86%~112.21%之間。該方法操作簡單，靈敏度和準確度高，能夠有效的檢測甲磺酸倍他司汀中MMS、EMS和IMS的含量。

 

       6.HS-GC-MS法測定甲苯磺酸舒他西林中甲苯磺酸甲酯、乙酯、異丙酯本文利用島津公司GCMS-QP2020 NX氣相色譜-質譜聯用儀結合HS-20頂空進樣器，參照《歐洲藥典》9.0和ICH指導原則，建立了以甲磺酸丁酯（BMS）為內標，通過碘化鈉衍生化，測定甲苯磺酸舒他西林原料藥中甲苯磺酸甲酯（MTS）、甲苯磺酸乙酯（ETS）和甲苯磺酸異丙酯（ITS）的方法并完成方法學驗證。在1.5~250ng/mL濃度范圍內MTS和ETS衍生化后的碘甲烷（MeI）和碘乙烷（EtI）線性關系良好，在3~250ng/mL內ITS衍生后的（iPrI）線性關系良好，相關系數均達到0.998以上，樣品加標平行測定6次，計算各組分含量RSD均小于4.50%。樣品在20，40，60ng/mL加標濃度時，MTS、 ETS和ITS回收率在92.50 %~108.13%之間。該方法操作簡單，靈敏度和準確度高，能夠有效的檢測甲苯磺酸舒他西林中MTS、ETS和ITS的含量。

 

       7.HS-GC-MS法測定苯磺酸氨氯地平中苯磺酸甲酯、乙酯、異丙酯本文利用島津公司GCMS-QP2020 NX氣相色譜-質譜聯用儀結合HS-20頂空進樣器，參照《歐洲藥典》9.0和ICH指導原則，建立了以甲磺酸丁酯（BMS）為內標，通過碘化鈉衍生化，測定苯磺酸氨氯地平原料藥中苯磺酸甲酯（MTS）、苯磺酸乙酯（ETS）和苯磺酸異丙酯（ITS）的方法并完成方法學驗證。在1.5~250ng/mL濃度范圍內MBS和EBS衍生化后的碘甲烷（MeI）和碘乙烷（EtI）線性關系良好，在3~250ng/mL內IBS衍生后的（iPrI）線性關系良好，相關系數均達到0.999以上，樣品加標平行測定6次，計算各組分含量RSD均小于5.46%。樣品在5，10，15ng/mL加標濃度時，MBS、 EBS和IBS回收率在85.4 %~104.70%之間。該方法操作簡單，靈敏度和準確度高，能夠有效的檢測苯磺酸氨氯地平MBS、EBS和IBS的含量。