枸杞，又稱枸杞子、紅耳墜，是茄科小灌木枸杞的成熟子實。枸杞子藥食同源的歷史悠久，是馳名中外的名貴中藥材，早在《神農本草經》中就被列為上品，稱其為“久服輕身不老、耐寒暑”；有延衰抗老的功效，又名“卻老子”。枸杞子中含有多種氨基酸，并含有甜菜堿、玉蜀黍黃素、酸漿果紅素等特殊營養成分，使其具有非常好的保健功效。隨著大家對枸杞營養價值的認識，養生群體越來越大，對枸杞的需求日漸增多，枸杞中的農藥殘留也越來越受到大家的關注。

 

       本文依據2020版《中國藥典》2341通則農藥殘留量測定法新增第五法《藥材及飲片（植物類）中禁用農藥多殘留測定法》中的快速樣品處理法（QuEChERS），建立了枸杞中33種禁用農藥及其單體殘留量的測定方法，保證了枸杞食用的安全性。

 

       枸杞試樣用1%的冰醋酸水溶液進行浸泡使其充分浸濕，再用乙腈進行提取，以無水硫酸鎂、N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷鍵合硅膠、硅膠、石墨化碳黑的混合粉末進行分散式固相萃取凈化，最后用AutoEVA-20Plus全自動平行濃縮儀對提取液進行濃縮。實驗結果表明，33種禁用農藥在20-200ppb內線性關系良好，相關系數（R2>0.990）。除了殺蟲脒和氟蟲腈砜之外，其他化合物的回收率均在70-120%之間，RSD在15%以內。該方法簡單、快速、高效，且準確度和精密度均符合農藥多殘留的檢測要求，可用于枸杞中多農殘的快速篩查和測定。

 

       劃重點

       01儀器、試劑

 

       1儀器

       Raykol AutoEVA-20Plus全自動平行濃縮儀

       Agilent 1290+6470高效液相色譜/質譜聯用儀

       Agilent 8890+7000D氣相色譜/質譜聯用儀

       渦旋儀

       離心機

       2試劑

       乙腈（HPLC）、冰醋酸（AR）、超純水

       RayCureTM QuEChERS提取鹽包（6g無水硫酸鎂+1.5g無水醋酸鈉）

       RayCureTM QuEChERS分散式固相萃取凈化管

       陶瓷均質子

       GC-MS/MS法33種農藥混合標準儲備液：0.2/0.4/1.0 μg/mL

       LC-MS/MS法30種農藥混合標準儲備液：0.2/0.4/1.0 μg/mL

       GC-MS/MS法內標使用液：磷酸三苯酯 0.1 μg/mL

       劃重點

       02樣品前處理

       1  準確稱取枸杞試樣3 g，加入15mL 1%冰醋酸溶液，渦旋混勻并震蕩2 min，靜置30 min

       2  準確加入乙腈15 mL，渦旋混勻并震蕩5 min

       3  加入RayCureTM提取鹽包和一顆陶瓷均質子，立即搖散，震蕩1 min后置于冰水浴中10 min

       4  4000 r/min離心5 min，取上清液9 mL置于凈化管中，渦旋使充分混勻，并震蕩5 min使凈化完全

       5  放冷的樣液轉移至10 mL容量瓶中，用乙腈多次潤洗濃縮杯并轉移至容量瓶中，最終用乙腈定容至刻度。

       6  將凈化管4000 r/min離心5 min，準確吸取上清液5 mL轉移至20 mL玻璃試管中

       7  使用睿科AutoEVA-20Plus全自動平行濃縮儀氮吹至約0.4mL后取出，加乙腈稀釋定容至1 mL

 

       劃重點

       03檢測條件

       氣質聯用色譜圖

       液質聯用色譜圖

 

       劃重點

       04樣品測試

       提取液凈化

 

       枸杞基質較為復雜，含有大量的糖類、蛋白質和色素，所以共萃取物較多。

       一方面基質殘留會使得目標化合物的響應被抑制或者增強，而農藥是容易受到基質影響的分析物；

       另一方面雜質會在色譜柱中積聚，也會縮短色譜柱的壽命。

       本實驗采用RayCure分散式固相萃取凈化管對提取液進行凈化，提高色譜柱的壽命。該凈化柱的填料為復合填料，由無水硫酸鎂、N-丙基乙二胺、十八烷基硅烷鍵合硅膠、硅膠、石墨化碳黑混合。其中，無水MgSO4起到吸收水分的作用，以保證上氣質前樣品不含水分；C18可以去除樣品基質中的脂肪和脂類等非極性干擾物；PSA可以去除糖類、脂肪酸、有機酸和酚類等干擾物質；GCB可以去除色素和甾醇。提取液為黃色，經過化后提取液幾乎為無色透明的溶液，說明該枸杞提取液被充分凈化。

 

       在枸杞樣品中添加濃度為40 μg/kg的33種農藥（GC-MS/MS）和20 μg/kg的30種農藥（LC-MS/MS）進行加標回收驗證

 

       劃重點

       05總結

       樣品在加入提取鹽包后要立即搖散，否則容易結塊。使用陶瓷均質子可以防止萃取鹽結塊，并能夠均勻地分散樣品，提高萃取效率，降低人力成本。

       加入提取鹽包后會放出大量的熱，所以振蕩后需盡快放入冰水浴中冷卻，或者用預冷的乙腈，防止對熱不穩定化合物造成影響。

       在氮吹濃縮過程中，溫度不能超過40°C，氮氣壓力不能過大，濃縮時注意不能吹干，否則將導致部分化合物損失。

 

       劃重點

       06解決方案優勢

 

       本解決方案高效，提取和凈化效果優異。AutoEVA 20Plus全自動平行濃縮儀可以實現30個樣品同時濃縮，極大的提高了濃縮效率，并且儀器可實現針隨液面的高度下降，加快濃縮速度，節約氮氣成本；人性化的可視化窗口設計可以看到樣品濃縮剩余體積，避免吹干。RayCureTM QuEChERS提取鹽包和凈化管采用進口高品質填料，嚴格按照藥典標準進行等量封裝，即拿即用，提取和凈化效果好，可以節約寶貴的人力資源和時間成本。