所謂波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是指波長(zhǎng)的實(shí)際測(cè)定值與理論值(真值) 之差。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是儀器很重要的技術(shù)指標(biāo), 我們實(shí)驗(yàn)中測(cè)試數(shù)據(jù)都是以某波長(zhǎng)處的吸收值去計(jì)算，對(duì)同一物質(zhì)在不同波長(zhǎng)測(cè)試時(shí), 由于不同波長(zhǎng)時(shí)摩爾吸光系數(shù)不同, 就會(huì)有不同的靈敏度，如果波長(zhǎng)偏差大就會(huì)產(chǎn)生分析誤差。對(duì)于不同的紫外分光光度計(jì)，如果波長(zhǎng)偏差過(guò)大，就無(wú)法進(jìn)行比較或者比較不出正確的結(jié)果。
紫外分光光度計(jì)屬于國(guó)家強(qiáng)制計(jì)量檢定設(shè)備，相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)有三項(xiàng)：《GBT 26798-2011 單光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)》、《GBT 26813-2011 雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)》和《JJG 178-2007 紫外可見(jiàn)近紅外分光光度計(jì)》，我們以GB/T 26813-2011為例介紹下如何進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度測(cè)量，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是用能量法測(cè)試低壓石英汞燈的特征發(fā)射譜線，或者用氧化鈥溶液、氧化鈥玻璃、鐠釹玻璃特征吸收峰（透射率）測(cè)試三次，對(duì)儀器測(cè)量數(shù)據(jù)與檢定證書(shū)上的標(biāo)稱(chēng)值進(jìn)行差值計(jì)算并對(duì)比，對(duì)儀器檢定分級(jí)。
我們來(lái)看看標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)于工具的使用說(shuō)明：首先儀器出廠前，都會(huì)對(duì)波長(zhǎng)進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)的工具一般都是低壓石英汞燈，汞燈具有光譜能量大、穩(wěn)定性好、體積小等特點(diǎn)。下圖就是汞燈的特征譜線，大家可以看出其基本上覆蓋了紫外和可見(jiàn)光波長(zhǎng)范圍。
鈥玻璃和鈥溶液也可作波長(zhǎng)校正用，但因來(lái)源不同或隨著時(shí)間的推移會(huì)有微小的變化，使用時(shí)應(yīng)注意，一般用于儀器校驗(yàn)。其適用波長(zhǎng)范圍為241 – 640 nm，而鐠釹玻璃的適用波長(zhǎng)范圍為430-890nm，由于沒(méi)有校準(zhǔn)到紫外區(qū)，實(shí)用性更小。
波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的測(cè)定涉及到了低壓石英汞燈、氧化鈥溶液、氧化鈥玻璃、鐠釹玻璃等多種校正工具，如果不同工具測(cè)試結(jié)果不相同，那么我們應(yīng)該優(yōu)先采納哪個(gè)結(jié)果呢？標(biāo)準(zhǔn)對(duì)此做出了明確的說(shuō)明：GB/T 26813-2011中5.2.2指出以上工具采納的優(yōu)先順序是低壓石英汞燈>氧化鈥溶液>氧化鈥玻璃>鐠釹玻璃。由于目前市場(chǎng)上有大量的第三方計(jì)量機(jī)構(gòu)，技術(shù)水平參差不齊，計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)工具時(shí)有保存不當(dāng)，計(jì)量結(jié)果準(zhǔn)確度也不高。有時(shí)遇到計(jì)量機(jī)構(gòu)的鐠釹玻璃和廠家的低壓石英汞燈測(cè)試結(jié)果相矛盾時(shí)，一般來(lái)說(shuō)還是汞燈的測(cè)試結(jié)果更加可信。
由于很多國(guó)標(biāo)規(guī)定的測(cè)試儀器都有儀器等級(jí)要求，因此，各儀器廠家都對(duì)儀器波長(zhǎng)準(zhǔn)確度非常重視。以島津紫外分光光度計(jì)為例，儀器出廠時(shí)會(huì)提供出廠報(bào)告，報(bào)告里包括了出廠檢定時(shí)儀器的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度。島津儀器的包裝都會(huì)通過(guò)跌落測(cè)試，以保證儀器在運(yùn)輸過(guò)程中的震動(dòng)不會(huì)影響儀器的光學(xué)性能。即使經(jīng)過(guò)長(zhǎng)途運(yùn)輸振動(dòng)，劇烈的搬運(yùn)晃動(dòng)導(dǎo)致儀器光路發(fā)生偏差，儀器內(nèi)部的校正程序也能校正回來(lái)，島津紫外分光光度計(jì)每次開(kāi)機(jī)初始化自檢時(shí)，最后一項(xiàng)波長(zhǎng)原點(diǎn)檢查，其實(shí)就是通過(guò)氘燈的輝線波長(zhǎng)（656.1nm）對(duì)儀器波長(zhǎng)進(jìn)行校準(zhǔn)以保證儀器的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度長(zhǎng)期處于優(yōu)良狀態(tài)。各位使用島津紫外的小伙伴們?nèi)绻枰ㄆ谛ｒ?yàn)儀器的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度，可以使用隨機(jī)附帶的《UV Performance Validation Software》軟件進(jìn)行全自動(dòng)的校驗(yàn)。總的來(lái)說(shuō)島津分光光度計(jì)從設(shè)計(jì)、運(yùn)輸、使用、校驗(yàn)等各方面保證了儀器的波長(zhǎng)準(zhǔn)確性，各位小伙伴就放心的使用吧。
