孔雀石綠和結晶紫均為人工合成的有機化合物，屬于三苯甲烷類化學物，既是染料，也是殺真菌、殺細菌、殺寄生蟲的藥物。2019年12月27日，孔雀石綠被列入食品動物中禁止使用的藥品及其他化合物清單[1]。毒理學實驗表明，結晶紫是一種劑量相關的致癌物質， 應避免長期、大劑量和大面積使用。本文建立了孔雀石綠和結晶紫殘留量的測定方法。
關鍵詞：
孔雀石綠，結晶紫，ShimNex CS C18，HPLC，熒光檢測器
實驗部分Part One
1.1 實驗儀器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色譜儀（RF-20A熒光檢測器）；
色譜柱：ShimNex CS C18 5 μm 4.6×250 mm （貨號：380-01230-01）；
SHIMSEN Disc HPTFE針式過濾器（貨號：380-00341）；
LC/MS認證樣品瓶LabTotal Vial（貨號：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液槍：SHIMSEN Pipet PMII-10（貨號：380-00751-02），SHIMSEN Pipet PMII-100（貨號：380-00751-04），SHIMSEN Pipet PMII-1000（貨號：380-00751-06）。
1.2 對照品溶液的制備
取隱色孔雀石綠和隱色結晶紫對照品適量加乙腈制成每1 mL含隱色孔雀石綠和隱色結晶紫各0.1 μg的溶液。
1.3 分析條件
色譜柱：ShimNex CS C18 5 μm 4.6×250 mm （貨號：380-01230-01）
柱溫：35℃
檢測器：激發波長265 nm；發射波長360 nm
流速：1.3 mL/min
進樣量：20 μL
流動相：A：0.05 M乙酸銨緩沖液（pH 4.5），B：乙腈，A：B = 20：80
本文建立了水產品中孔雀石綠和結晶紫殘留量的測定的HPLC-熒光檢測器方法。參照GB/T 20361-2006中的色譜條件，采用色譜柱ShimNex CS C18 對孔雀石綠、結晶紫的衍生產物隱色孔雀石綠、隱色結晶紫進行分析。結果顯示各組分峰形和重現性良好，分離度大于 1.5 滿足檢測要求。此方法可為水產品中孔雀石綠和結晶紫殘留量的測定提供參考。
