導(dǎo)言

紫外可見分光光度計(jì)在藥廠有著廣泛的應(yīng)用，根據(jù)藥典通則0401《紫外-可見分光光度法》規(guī)定，企業(yè)需要定期校驗(yàn)紫外—可見分光光度計(jì)，校驗(yàn)內(nèi)容主要包括了波長準(zhǔn)確度、吸光度準(zhǔn)確度和雜散光三個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目，有些客戶自己校驗(yàn)時(shí)會(huì)失敗，而這三個(gè)項(xiàng)目中又以吸光度準(zhǔn)確度測試失敗率最高。

藥廠小伙伴一般是使用重鉻酸鉀溶液校驗(yàn)紫外可見分光光度計(jì)，準(zhǔn)確稱量和配制一般難不住大家，但是有些小細(xì)節(jié)如果不注意會(huì)導(dǎo)致校驗(yàn)的失敗，下面介紹一下吸光度準(zhǔn)確度測試的注意點(diǎn)：

01實(shí)驗(yàn)室溫度

藥典中并沒有明文規(guī)定校驗(yàn)時(shí)的實(shí)驗(yàn)室溫度，正常情況下校驗(yàn)應(yīng)該是在20℃下進(jìn)行的，那么溫度對溶液的吸光度有影響嗎？根據(jù)《JJG 178紫外可見近紅外分光光度計(jì)》的數(shù)據(jù)，60mg/L重鉻酸鉀溶液在235nm下，10℃時(shí)透過率為18.0%換算為吸收系數(shù)是124.1，而30℃時(shí)透過率為18.3%換算吸收系數(shù)為122.9，而235nm處允許的吸收系數(shù)為123.0-126.0，在30℃時(shí)本身就已經(jīng)不滿足校驗(yàn)要求了，所以溫度這一點(diǎn)一定要特別注意。

02比色皿的使用

實(shí)驗(yàn)需要使用潔凈的比色皿，對于有污垢的比色皿可以使用洗液浸泡，確保表面無劃痕。按照一般的實(shí)驗(yàn)要求，使用待測溶液潤洗三次以上就可以認(rèn)為消除了比色皿殘留溶劑的影響，而實(shí)際上在進(jìn)行儀器校驗(yàn)時(shí)，潤洗的要求會(huì)高很多，根據(jù)實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行6次以上的潤洗可以比較可靠的保證潤洗效果。同時(shí)由于比色皿兩個(gè)通光面的光學(xué)性能不一定完全一致，在使用比色皿時(shí)，要注意調(diào)零和測試時(shí)比色皿通光面的方向不能改變。

03比色皿的選擇

目前的紫外可見分光光度計(jì)都是雙光路的儀器，本身可以消除參比光路和樣品光路的皿差，所以大家使用時(shí)并沒有特別注意比色皿的選擇，但是進(jìn)行儀器校驗(yàn)時(shí)，比色皿通光面材料的不均勻性、比色皿本身透過率的誤差、比色皿尺寸的誤差等都會(huì)導(dǎo)致校驗(yàn)不通過，建議使用質(zhì)量較好配對的比色皿（比色皿配對要求可參考《JJG 178紫外可見近紅外分光光度計(jì)》4.10吸收池的配套性）。

04比色皿架

比色皿架起到固定比色皿的作用，而對于一些使用時(shí)間比較久的儀器，比色皿架的定位簧片（下圖所示）已經(jīng)老化了，起不到固定比色皿的作用，這樣在測試時(shí)會(huì)導(dǎo)致光通過比色皿的不同位置，將比色皿本身不同位置透過率的誤差帶入到結(jié)果中，在校驗(yàn)時(shí)也需要注意這個(gè)影響。

05試劑

重鉻酸鉀有不同的試劑等級(jí)，建議選用優(yōu)級(jí)純或者基準(zhǔn)級(jí)試劑，以避免由于試劑雜質(zhì)影響導(dǎo)致計(jì)量不通過。重鉻酸鉀保存時(shí)保持密封、干燥以防受潮，而且保存和配制的時(shí)候盡量避光。

另外如果具備條件，建議考慮直接購買具有證書的配制好的重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，避光保存，開封后四小時(shí)內(nèi)使用，這樣可以消除試劑和配制帶來的影響。

以上就是紫外可見分光光度計(jì)吸光度準(zhǔn)確度校驗(yàn)時(shí)容易忽視的一些小細(xì)節(jié)，把握好這些小細(xì)節(jié)，同時(shí)再配以島津一流的分光光度計(jì)，大家在紫外校驗(yàn)的路上一定能順利達(dá)到目標(biāo)。