全自動固相萃取-氣相色譜-質譜法
測定生活飲用水中乙草胺的殘留量
乙草胺是一種在世界范圍內廣泛應用的除草劑，也是目前我國使用量最大的除草劑之一。具有殺草譜廣、效果突出、價格低廉和施用方便等優點。研究表明，乙草胺具有明顯的環境激素效應，能夠造成動物和人的蛋白質、DNA 損傷，脂質過氧化，對低等脊椎動物、浮游生物和中小型環節動物表現出較強的急性毒性，對人體健康以及環境安全存在著較大的威脅。水專項全國調查數據顯示，乙草胺在我國主要水廠的檢出率為61%。因此，GB 5749-2022 生活飲用水衛生標準將其列為新增檢測指標之一。
本文參考新版GB/T 5750.9征求意見稿中的前處理方法，采用睿科全自動固相萃取儀Fotector Plus實現對生活飲用水中乙草胺的快速富集和洗脫，然后用睿科Auto EVA 80全自動氮吹濃縮儀進行濃縮，外標法定量。在0.1 ug/L的加標水平下，乙草胺的回收率在88%-98%之間，RSD值小于5%。說明本方法可以滿足生活飲用水中乙草胺的快速檢測。
1 儀器、耗材與試劑
儀器
睿科Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀
睿科EVA 80高通量全自動平行濃縮儀
Agilent 7890A/5975C氣相色譜-質譜聯用儀
耗材
C18固相萃取柱（RayCure，500 mg/6mL，
貨號：RC-204-16004）
試劑
甲醇（優級純）、二氯甲烷（優級純）
乙酸乙酯（優級純）、超純水
抗壞血酸（分析純）、無水硫酸鈉（分析純）
2 樣品制備
采樣時，每升水樣中加入約100 mg抗壞血酸，以去除余氯。如水樣較為渾濁，則水樣中的顆粒物會堵塞固相萃取柱降低萃取速率，可使用0.45μm水系濾膜過濾水樣。
2.1富集
依次用5 mL二氯甲烷、5 mL乙酸乙酯、10 mL甲醇和10 mL超純水對固相萃取柱進行活化，活化速度為5 mL/min。準確量取500 mL水樣，加入10 mL甲醇助溶，以15 mL/min的流速通過固相萃取柱富集，上樣完畢后用氮氣以25 psi的壓力將柱子吹干25分鐘。用3 mL乙酸乙酯洗脫固相萃取柱，流速為1 mL/min，并浸泡5 min。之后再用3 mL二氯甲烷洗脫固相萃取柱，流速為1 mL/min，繼續浸泡5 min。收集全部洗脫液于玻璃試管中。具體方法如下圖所示。
2.2固相萃取條件
●全自動固相萃取儀：Fotector Plus高通量全自動固相萃取儀
●固相萃取柱：C18固相萃取柱（RayCure，500mg/6mL）
●活化：二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、超純水
●洗脫：二氯甲烷，乙酸乙酯
2.3將洗脫液用睿科Auto EVA 80全自動氮吹濃縮儀在45 ℃條件下濃縮至1 mL，渦旋混勻，轉移至進樣小瓶上GC/MS分析。
3 氣質聯用檢測條件
采用SIM模式進行定性分析，選擇離子見表-1。GC-MS檢測條件：進樣口溫度280 ℃，不分流進樣，進樣量2.0 μL；載氣為高純氦氣，恒流模式；電子轟擊電離源（EI），離子源溫度230 ℃，接口（傳輸線）溫度280 ℃，質量分析器溫度150 ℃，溶劑延遲時間10 min。
色譜柱：HP-5MS 30m*0.25mm*0.25μm
進樣口溫度：280 ℃
柱流速：1 mL/min
進樣量：2 μL
初始溫度：85 ℃
階升：以20 ℃/min速度升溫至165 ℃，保持2 min；以5 ℃/min速度升溫至220 ℃，再以50 ℃/min速度升溫至280 ℃，保持2 min
進樣方式：不分流進樣
載氣：高純氦氣，恒流模式
MSD傳輸線輔助加熱：280℃
離子源溫度：230℃
四級桿溫度：150℃
模式：SIM
溶劑延遲：10 min
4 結果與討論
為了驗證該方法的回收率，本實驗向純水樣品(500 mL)加入乙草胺標準品（0.05 ug）進行加標回收驗證(n=3)，數據如表-2所示。加標回收率在88%-98%之間，RSD值控制在5%以內。說明該方法能夠很好地運用于生活飲用水中乙草胺的檢測。
5 總結
乙草胺在水中的溶解度很低，在做加標實驗時使用的標液建議用甲醇稀釋，并在水樣中加入一定量的甲醇或丙酮助溶以減少瓶壁黏附；
查閱文獻發現pH增大會增強乙草胺的降解效率，建議水樣在中性條件下進行萃取；
洗脫過程中流速不宜過快，應控制在1 mL/min以內，并使洗脫溶劑充分浸泡SPE小柱以保證目標物被充分洗脫。
(責任編輯：金利儀器lyh)
