新冠病毒的快速檢測(cè)對(duì)于對(duì)于病毒攜帶或感染者的篩查至關(guān)重要，也是影響疫情防控的關(guān)鍵因素。當(dāng)前，實(shí)時(shí)熒光RT-PCR依然是病毒檢測(cè)的主要方法，而分析科學(xué)家正嘗試?yán)�用MALDI-TOF的簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確和靈敏等特點(diǎn)，將Affi-BAMS這一靶向蛋白組學(xué)的研究方法應(yīng)用于新冠病毒的檢測(cè)和分析中。與核酸檢測(cè)不同，Affi-BAMS可以特異性的檢測(cè)病毒抗原的S蛋白，為新冠病毒的檢測(cè)和研究提供新的思路。

 

       Affi-BAMS是什么？

       Affi-BAMS是Affinity-Bead Assisted Mass Spectrometry（親和磁珠輔助質(zhì)譜技術(shù)）的簡(jiǎn)稱(chēng)，是一種利用免疫親和技術(shù)對(duì)靶蛋白（多肽）進(jìn)行特異性檢測(cè)的解決方案。該方案是基于布魯克MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)，由布魯克和Adeptrix公司共同開(kāi)發(fā)。Affi-BAMS將免疫磁珠，微陣列和MALDI-TOF質(zhì)譜三種常見(jiàn)生化分析技術(shù)結(jié)合起來(lái)，可以實(shí)現(xiàn)多靶點(diǎn)的蛋白檢測(cè)和定量。

 

       Affi-BAMS怎么做？

       生物樣本首先進(jìn)行細(xì)胞裂解，裂解后的蛋白溶液進(jìn)行酶解，被抗體包被的磁珠加入酶解后的多肽溶液中形成懸浮液，經(jīng)孵育后，目標(biāo)多肽被磁珠上的抗體捕獲。結(jié)合多肽的磁珠被轉(zhuǎn)移至可導(dǎo)電的載玻片上，這一載玻片與多孔格硅橡膠墊片緊密貼合，每個(gè)磁珠被硅膠網(wǎng)格獨(dú)立隔開(kāi)，經(jīng)過(guò)多孔格硅橡膠墊片的介導(dǎo)，磁珠在載玻片上呈微陣列分布。通過(guò)基質(zhì)噴霧儀對(duì)磁珠陣列進(jìn)行MALDI基質(zhì)的噴涂，磁珠陣列暴露在含有MALDI基質(zhì)的氣溶膠里，其上結(jié)合的多肽會(huì)被洗脫到各自的微孔中。待溶劑蒸發(fā)后，洗脫得到的多肽與MALDI基質(zhì)在載玻片上形成共結(jié)晶的斑點(diǎn)。將硅橡膠墊片移除，空氣流吹走載玻片上殘留的磁珠，通過(guò)MALDI-TOF分析載玻片上的每個(gè)獨(dú)立的陣列斑點(diǎn)，可以得到相應(yīng)斑點(diǎn)中存在的多肽的質(zhì)譜信息。

 

       Affi-BAMS有何用？

       Affi-BAMS在靶向蛋白組學(xué)中有廣泛的應(yīng)用，目前已經(jīng)研發(fā)出一系列試劑盒，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)特定靶蛋白的檢測(cè)和定量分析。以阿爾茲海默癥的研究為例，為經(jīng)過(guò)免疫磁珠富集后，正常人和患者腦脊液中β-淀粉樣蛋白MALDI-TOF分析結(jié)果的對(duì)比情況，該方法可以特異性地鑒別從aa672到aa713的19個(gè)多肽片段。以其中Aβ1–40多肽為基準(zhǔn)對(duì)其他多肽的MALDI-TOF質(zhì)譜圖進(jìn)行歸一化處理后，可以看出正常人和患者樣本中β-淀粉樣蛋白的含量存在明顯差異。

 

       Affi-BAMS還能檢測(cè)病毒？

       Affi-BAMS可以用于新冠病毒抗原的檢測(cè)，使用免疫磁珠特異性結(jié)合病毒的S蛋白（spike S glycoprotein），可以實(shí)現(xiàn)微量樣本中S蛋白的富集，大大提高質(zhì)譜分析的靈敏度，富集后的蛋白采用MALDI-TOF進(jìn)行分析，從而實(shí)現(xiàn)新冠病毒的快速檢測(cè)。目前，針對(duì)于新冠病毒S蛋白的免疫磁珠已經(jīng)處于最終測(cè)試階段。